葡萄糖凝胶柱色谱洗脱顺序？

一、葡萄糖凝胶柱色谱洗脱顺序？

Sephadex LH20的分离原理主要有两方面：以凝胶过滤作用为主，兼具反相分配的作用（在反相溶剂中）。

因为凝胶过滤作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脱下来，小分子的化合物保留强，最后出柱。如果使用反相溶剂洗脱， Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用，所以极性大的化合物保留弱，先被洗脱下来，极性小的化合物保留强，后出柱。如果使用正相溶剂洗脱，这主要靠凝胶过滤作用来分离。

二、凝胶柱特点？

凝胶 凝胶属性与人体皮肤相似，美容用的硅胶就是一种凝胶。溶胶或溶液中的胶体粒子或高分子在一定条件下互相连接，形成空间网状结构，结构空隙中充满了作为分散介质的液体。介质被包围在网眼中间，不能自由流动，因而形成半固体。 凝胶具有弹性、散热等功能，不会挤压皮肤，能够缓冲和分散压力，所以也被用来制作美容、寝具等美容、生活用品。 优点：亲肤性，不会挤压皮肤；有弹性，能够缓冲和分散压力；感温散热，保持凉感。 缺点：价格较贵。

三、葡萄糖凝胶是什么？

葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶，含有大量的羟基，很容易在水中和电解质溶液中溶胀。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度，因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。

葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程，可在较低的压力下获得较高的流速。另外，粗级也可用于批量工艺。

四、凝胶净化柱的用途？

凝胶层析是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中，然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中，只留在凝胶颗粒之间的流动相中，因此以较快的速度首先流出层析柱，而小分子则能自由出入凝胶颗粒中，并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡，

因此就要花费较长的时间流经柱床，从而使不同大小的分子得以分离都是排阻色谱。 但是前者是制备柱，对大量样品进行分离，柱子口径大，一般要有切割承样的尾接装置；后者是分析柱，主要目的是对小量样品进行分析，柱子直径小，一般还有柱温箱，对泵的稳定性要求高，必须接检测器

五、硅胶柱色谱和凝胶柱色谱的区别？

主要区别在于填料类型、柱子大小、吸附（扩散）原理以及分离物质不同。硅胶柱层析原理：硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离， 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。凝胶柱色谱也称为凝胶过滤色谱、分子筛色谱、凝胶渗透色谱(GPC)、排阻色谱。它主要是利用凝胶网状结构的分子筛作用，根据被分离物分子大小不同进行分离。具有的优点有分离条件温和，适用于不稳定的分子; 样品回收率高，几乎可达100%; 重复性高; 操作的时间相对较短，所需要的设备简单、经济

葡聚糖凝胶柱层析,其主要用于分离黄酮类化合物

六、凝胶柱的填料是什么？

填充柱是指填充了固定相的色谱柱。将色谱分析的固定相（吸附剂、涂渍了固定液的载体、离子交换树脂、凝胶颗粒等）作为填料，填充于一定口径、长度和形状的柱管中。

填充柱的优点是制备和使用方法都比较容易掌握，具有多种填料可供选择，能满足一般样品分析要求。

七、凝胶色谱柱压力高会怎样？

色谱柱是高效液相的心脏，在液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透性，延长柱子的使用寿命是非常重要。色谱柱压力过高、过低都属于柱压问题。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质，造成流体阻力加大所致。

1、流动相的前处理：　　流动相或杨平中杂质堵塞色谱柱进口滤片，导致压力升高。这是由于流动相可能没有过滤，或过滤不彻底，使固体杂质滞留于滤板上所致。另一个方面也可能没有使用预保护柱所致。　　2、样品的沉淀：　　当流动相与溶解样品的溶剂不一致时，样品进入色谱柱时，可能因溶解度降低而沉淀出来吸附于柱内，造成压力升高。　　3、晶体的析出：　　使用含有缓冲液的流动相时，缓冲液中的无机盐可能会残留在体系之中，它们会因在新流动相中的溶解度降低而析出阻塞而压力升高。　　4、细菌或霉菌滋生：　　流动相中、管路中或柱子进口处繁殖、生长霉菌堵塞滤板，导致压力升高。所以在使用磷酸盐缓冲液时一般要现配现用。　　5、溶质吸附：　　一些溶质在色谱柱上有较强大的吸附力，洗脱时流动相也难以清除掉，累积的未洗脱溶质也会造成阻力增大从而造成压力升高。　　6、流动相更换过度较快：　　当改变流动相体系时，不彻底的更换使不同性质、互不混溶的流动相存在于同一个体系之中，也会造成压力升高。　　7、压力脉冲：　　运行过程中，有时会产生整个液相色谱仪系统内压力的突然升降。如泵压力变化，此所形成的压力脉冲会造成多孔填料的崩坏和柱床结构的微小变化，填料微屑的长期积累也可能会使柱床阻力增大，造成压力升高。

八、凝胶色谱冲柱需多久？

凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术，是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技 术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果。凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。

很显然，凝胶色谱冲柱需几个小时。

九、凝胶色谱柱可以反冲吗？

色谱柱是指装填有固定相用以分离混合组分的柱管。由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。色谱柱两端的柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，孔径0.2~20µm(5~10µm)，取决于填料粒度，目的是防止填料漏出。整体柱的优点包括：可以原位制备，省去制备填料和装柱，也可以同法制成聚合物颗粒后再装柱；聚合物易于制备，柱子的长度和直径在一定程度上不受限制；

很显然，凝胶色谱柱可以反冲。

十、高中凝胶色谱柱的作用？

凝胶色谱法是用来分离蛋白质的。分蛋白质分子小的进入凝胶内部。路程比较长，移动速度比较慢。而相对分子质量比较大的蛋白质只被排除于凝胶颗粒之外。路程比较短，移动速度比较快。这样相对分子质量，不同的蛋白质分子就得以分离，而分子比较大的最先洗脱出来。分子小的最后洗脱出来。分子小的最后洗脱出来。